不同昆蟲(chóng)響應(yīng)各種植物次 生代謝物質(zhì)的解毒酶基因存在差異。美國(guó)白蛾體內(nèi) 響應(yīng)槲皮素誘導(dǎo)的 P450 基因的種類(lèi)以及這些基因 對(duì)槲皮素的響應(yīng)模式和機(jī)制尚不清楚。恒溫培養(yǎng)箱(寧波江南儀器廠(chǎng),中國(guó)), 電泳儀(六一生物,中國(guó)北京),體視顯微鏡(徠卡, 德國(guó))PCR 儀、CFX96 型實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè)系 統(tǒng)(Bio-Rad,美國(guó)),凝膠成像系統(tǒng)(Aplegen,美國(guó)),超微量紫外分光光度計(jì) NanoDrop 8000(Thermo, 美國(guó)),超凈臺(tái)(蘇州凈化,中國(guó)),臺(tái)式離心機(jī)、 搖床、超低溫冰箱(Thermo,美國(guó)),普通冰箱(海 爾,中國(guó)青島),微量注射器(哈美頓博納圖斯,瑞 士),恒溫水浴鍋(上海精宏,中國(guó)),電子天平 (Sartorius,德國(guó))。
P450 是一類(lèi)廣泛分布于生命有機(jī)體的代謝酶系, 在植食性昆蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育、激素生物合成、解毒代謝 等過(guò)程中發(fā)揮著多種生理功能。從美國(guó)白 蛾的中腸轉(zhuǎn)錄組中篩選出了響應(yīng)槲皮素誘導(dǎo)而顯著差 異表達(dá)的 5 個(gè) P450 基因,除 CYP4G297 外,其余均 為美國(guó)白蛾物種中新鑒定的解毒酶基因。導(dǎo)致幼蟲(chóng)出現(xiàn) 體重增加量減少以及死亡率顯著升高的現(xiàn)象。但由于 本研究設(shè)置的槲皮素濃度梯度有限,美國(guó)白蛾幼蟲(chóng)對(duì) 槲皮素耐受的濃度范圍還不明確,在將來(lái)的研究中可 以增加槲皮素飼養(yǎng)試驗(yàn)的濃度梯度設(shè)置,對(duì)參與槲皮 素解毒代謝的多基因進(jìn)行沉默。